Отправить статью по E-mail Оценка влияния клеточной трансплантации на процессы репарации ДНК в гепатоцитах крыс после повреждения тетрахлоридом углерода (ССl4) с использованием метода ДНК-комет
- Авторы: Шабашева Л.В.1, Протасова Г.А.1, Попов В.Б.1
-
Учреждения:
- ФГУП «Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека» Федерального медико-биологического агентства
- Выпуск: № 1 (2023)
- Страницы: 30-36
- Раздел: Оригинальные статьи
- Статья опубликована: 23.02.2023
- URL: https://gynecology.orscience.ru/0869-7922/article/view/641481
- DOI: https://doi.org/10.47470/0869-7922-2023-31-1-30-36
- ID: 641481
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Введение. Проведена экспериментальная оценка влияния четырёххлористого углерода — хлорорганического соединения с химической формулой ССl4 (тетрахлорид углерода, фреон-10, асордин, хладон-10) и трансплантации клеток фетальной печени (КФП) на степень деградации и процессов репарации ДНК в клетках печени крыс, используя метод щелочного гель-электрофореза единичных клеток.
Материал и методы. Острое токсическое поражение печени крыс моделировали однократным внутрижелудочным введением крысам-самкам линии Вистар препарат CCl4 в масляном растворе в дозе 3000 мг/кг массы тела. В качестве протекционного средства использовали суспензию КФП 19-суточных плодов крысы. Для количественной оценки и степени повреждения ядерной ДНК клеток печени применяли метод щелочного электрофореза единичных клеток (ДНК-комет) на 1-, 3-, 5-, 7-е и 16-е сутки эксперимента.
Результаты. Внутривенное введение КФП через 6 ч после воздействия тетрахлорметана активировало процессы репарации ДНК в гепатоцитах крыс на 5–7-е сутки, что приводило к снижению интенсивности повреждения ядерной ДНК. Тенденция к уменьшению числа неповреждённых гепатоцитов сохранялась и на 16-е сутки эксперимента, при этом усиление репаративных процессов после введения КФП реализовалось в достоверном сокращении количества гепатоцитов с высокой интенсивностью повреждения ядерной ДНК.
Ограничение исследования. Для предотвращения нежелательной гибели животных в группе, исследования были ограничены дозой 3000 мг/кг м. т. препарата CCl4 в масляном растворе.
Заключение. Использованный в наших экспериментах метод щелочного гель-электрофореза единичных клеток (ДНК-комет) позволил количественно оценить степень повреждения генома и его репарацию. Выявленные позитивные результаты свидетельствовали о протекторной роли КФП на структуру ДНК клеток печени крыс, после острого воздействия CCl4.
Соблюдение этических стандартов. Исследование выполнено с соблюдением правил биоэтики, утверждённых Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей.
Участие авторов. Все соавторы внесли равнозначный вклад в исследование и подготовку статьи к публикации.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов
Финансирование. Исследование выполнено в рамках реализации государственной программы Российской Федерации «Развитие здравоохранения».
Поступила в редакцию: 09 августа 2022 / Принята в печать: 2023 / Опубликована: 28 февраля 2023
Об авторах
Лилия Владимировна Шабашева
ФГУП «Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека» Федерального медико-биологического агентства
Автор, ответственный за переписку.
Email: shabash69@gmail.com
Старший научный сотрудник лаборатории Общей токсикологии и гигиенического регламентирования ФГУП «НИИ ГПЭЧ» ФМБА России, 188663, Ленинградская область.
e-mail: shabash69@gmail.com
РоссияГалина Аркадьевна Протасова
ФГУП «Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека» Федерального медико-биологического агентства
Email: galasr@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5754-3204
Кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник, ФГУП НИИ гигиены профпатологии и экологии человека ФМБА России, 188663, Санкт-Петербург, Российская Федерация.
e-mail: GalaSR@mail.ru
РоссияВадим Борисович Попов
ФГУП «Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека» Федерального медико-биологического агентства
Email: vpopovlr@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-8239-0345
Доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник, ФГУП НИИ гигиены профпатологии и экологии человека ФМБА России, 188663, Санкт-Петербург, Российская Федерация.
e-mail: vpopovlr@mail.ru
РоссияСписок литературы
- Филиппов Э.В. Использование метода «ДНК-комет» для детекции и оценки степени повреждений ДНК клеток организмов растений, животных и человека, вызванных факторами окружающей среды (обзор). Наука и образование. 2014; 2: 72–8.
- Жанатаев А.К., Дурнев А.Д., Середин С.Б. Метод ДНК-комет в генотоксикологических исследованиях. Гигиена и санитария. 2011; 5: 86–90.
- Кропотов А.В., Челомин В.П., Слободкова В.В., Солодова Е.Е., Михайлов А.О. Оценка генотоксичности тетрахлорметана и защитного действия сибилина и хаурантина с помощью метода ДНК-комет в печени крыс. Тихоокеанский медицинский журнал. 2013; 2 : 63–6.
- Бурганова Г.Р., Титова А.А., Шарипова Э.И., Певнев Г.О., Мавликеев М.О., Газизов И.М. и др. Влияние трансплантации перисинусоидальных клеток печени на регенерацию печени крыс после повреждения четырёххлористым углеродом и 2-ацетиламинофлуореном. Гены & Клетки. 2014; 9(3): 53–8.
- Люндуп А.В. Применение мезенхимальных стромальных клеток костного мозга для коррекции фиброзирующего повреждения печени: Автореф. дис. … канд. мед. наук. М.; 2008.
- Киясов А.П., Одинцова А.Х., Гумерова А.А., Газизов И.М., Фаррахов А.З., Кундакчян Г.Г., и др. Трансплантация аутогенных гемопоэтических стволовых клеток больным хроническими гепатитами. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2008; 3(1): 70–5.
- Протасова Г.А., Шабашева Л.В., Попов В.Б. Коррекция токсического поражения печени стволовыми клетками. Токсикологический вестник. 2020; 4(163): 21–6.
- Жанатаев А.К., Лисицына Т.А., Дурнев А.Д. Применение метода щелочного гель-электрофореза изолированных клеток для оценки генотоксических свойств природных и синтетических соединений: Методические рекомендации. М.; 2006.
- Чаушева А.И. Анализ генетической стабильности мультипотентных мезенхимных стромальных клеток человека в культуре: Автореф. дис. … канд. мед. наук. М.; 2012.
- Glantz S.A. Primer of Biostatistics. 3rd ed. New-York − Toronto: McGraw-Hill; 1992.
- Zar J.H. Biostatistical Analysis. 2nd ed. New Jersey: Prentice Hall; 1984.
- Кравченко Л.В., Трусов Н.В., Ускова М.А., Аксенов И.В., Авреньева Л.И., Гусева Г.В. и др. Характеристика острого токсического действия четырёххлористого углерода как модели окислительного стресса. Токсикологический вестник. 2009; 1: 12–8.
- Петракова О.С., Черниогло Е.С., Терских В.В., Калистратова Е.Н., Васильев А.В. Использование клеточных технологий в лечении патологий печени. Acta naturae. 2012; 4(3(14): 18–33.
- Нартайлаков М.А., Муслимов С.А., Янгиров И.В. Возможности стимуляции регенерации фетальными и биологическими материалами при циррозе печени. Медицинский вестник Башкортостана. 2006; 1(1): 1–12.
- Абдулкадыров К.М., Балашова В.А. Клеточный состав печени и селезёнки в фетальном периоде. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2008; 3(1): 46–8.
- Пирогова И.Ю., Пышкин С.А. Регенерационная терапия хронических гепатитов и циррозов печени с помощью трансплантации фетальных тканей. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2008; 3(1): 57–61.
Дополнительные файлы
