Позитивное действие YB-1 и мезенхимных стромальных клеток на первичную культуру гиппокампа в условиях блокады АСЕ2 рецептора

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Несмотря на то что в настоящее время ситуация с заболеваемостью COVID-19 не является чрезвычайной, в мире продолжают появляться все новые штаммы коронавируса SARS-CoV-2, некоторые из них обладают большей вирулентностью по сравнению с исходным вирусом. Исследования показали, что высокий риск тяжелого течения COVID-19 имели пациенты, страдающие болезнью Альцгеймера (БА), однако молекулярно-клеточный механизм такой предрасположенности не до конца выяснен. В данной работе была разработана клеточная модель начальной стадии COVID-19 на первичной культуре гиппокампа мышей 5xFAD, модели семейной формы БА, с использованием специфического ингибитора АСЕ2-рецептора MLN-4760. В основу этой модели положен экспериментально доказанный факт снижения активности рецепторов АСЕ2, которое наблюдается у пациентов с COVID-19 вследствие интернализации рецептора внутрь клетки после связывания с коронавирусом. С использованием иммунохимического окрашивания специфическими антителами для выявления нейронов (маркер МАР2) и астроглии (маркер GFAP) установлено, что через 24 ч после добавления в культуральную среду MLN-4760 (0.2 нмоль на 1 мл среды) отмечалось уменьшение плотности астроцитов и нейронов, изменение их морфологии с резким сокращением длины и плотности нейритов, что приводило к гибели клеточной культуры. При этом трансгенная культура оказалась более чувствительна к воздействию ингибитора по сравнению с контрольной культурой гиппокампа нативных мышей. Во второй части исследования были изучены возможности предотвращения разрушительного действия MLN-4760 на состояние гиппокампальной культуры. Показано, что применение YB-1, эндогенного полифункционального стресс-белка, способствовало восстановлению структуры культуры клеток и приводило к стимуляции роста нейритов и активации астроглии. Введение мультипотентных мезенхимных стромальных клеток (ММСК) после блокады АСЕ2 также сопровождалось улучшением выживаемости культур, восстановлением морфологии клеток, увеличением плотности астроцитов и нейронов. Полученные результаты свидетельствуют, что YB-1 и клеточная терапия с использованием ММСК являются перспективными вариантами для разработки новых эффективных методов предотвращения патологического влияния вируса на мозговую ткань, что является важным звеном в лечении инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Д. Ю. Жданова

Институт биофизики клетки РАН – обособленное подразделение Федерального государственного бюджетного учреждения науки «Федеральный исследовательский центр «Пущинский научный центр биологических исследований Российской академии наук»

Автор, ответственный за переписку.
Email: ddzhdanova@mail.ru
Россия, Пущино, 142290

А. В. Чаплыгина

Институт биофизики клетки РАН – обособленное подразделение Федерального государственного бюджетного учреждения науки «Федеральный исследовательский центр «Пущинский научный центр биологических исследований Российской академии наук»

Email: ddzhdanova@mail.ru
Россия, Пущино, 142290

Н. В. Бобкова

Институт биофизики клетки РАН – обособленное подразделение Федерального государственного бюджетного учреждения науки «Федеральный исследовательский центр «Пущинский научный центр биологических исследований Российской академии наук»

Email: ddzhdanova@mail.ru
Россия, Пущино, 142290

Р. А. Полтавцева

Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Министерства здравоохранения РФ

Email: ddzhdanova@mail.ru
Россия, Москва, 117997

Г. Т. Сухих

Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Министерства здравоохранения РФ

Email: ddzhdanova@mail.ru
Россия, Москва, 117997

Список литературы

  1. Akhtar A., Singh S., Kaushik R., Awasthi R., Behl T. 2024. Types of memory, dementia, Alzheimer’s disease, and their various pathological cascades as targets for potential pharmacological drugs. Ageing Res. Rev. 96, 102289.
  2. Gholami A. 2023. Alzheimer's disease: The role of proteins in formation, mechanisms, and new therapeutic approaches. Neurosci. Lett. 817, 137532.
  3. Singh M. K., Shin Y., Ju S., Han S., Kim S.S., Kang I. 2024. Comprehensive overview of Alzheimer’s disease: Etiological insights and degradation strategies. Int. J. Mol. Sci. 25, 6901.
  4. Tyagi K., Rai P., Gautam A., Kaur H., Kapoor S., Suttee A., Jaiswal P. K., Sharma A., Singh G., Barnwal R.P. 2023. Neurological manifestations of SARS-CoV-2: Complexity, mechanism and associated disorders. Eur. J. Med. Res. 28, 307.
  5. Swain S. P., Mahanta C.S., Maurya M., Mandal D., Parihar V., Ravichandiran V. 2024. Exploring SK/S1P/S1PR pathway as a target for antiviral drug development. Health Sciences Review. 11, 100177.
  6. Fan C., Wu Y., Rui X., Yang Y., Ling C., Liu S., Liu S., Wang Y. 2022. Animal models for COVID-19: Advances, gaps and perspectives. Signal Transduct. Target. Ther. 7, 220.
  7. Belotserkovskaya Y.G., Romanovskikh A.G., Smirnov I.P., Sinopalnikov, A.I. 2021. Long COVID-19. Consilium medicum, 23, 261–268.
  8. Hu C., Chen C., Dong X.P. 2021. Impact of COVID-19 pandemic on patients with neurodegenerative diseases. Front. Aging Neurosci. 13, 664965.
  9. Pulliam L., Sun B., McCafferty E., Soper S.A., Witek M.A., Hu M., Ford J.M., Song S., Kapogiannis D., Glesby M.J., Merenstein D., Tien P.C., Freasier H., French A., McKay H., Diaz M.M., Ofotokun I., Lake J.E., Margolick J.B., Kim E.-Y., Levine S.R., Fischl M.A., Li W., Martinson J., Tang, N. 2024. Microfluidic isolation of neuronal-enriched extracellular vesicles shows distinct and common neurological proteins in long COVID, HIV infection and Alzheimer’s disease. Int. J. Mol. Sci. 25, 3830.
  10. Rudnicka-Drożak E., Drożak P., Mizerski G., Zaborowski T., Ślusarska B., Nowicki G., Drożak M. 2023. Links between COVID-19 and Alzheimer’s disease – What do we already know? Int. J. Environ. Res. Public Health. 20, 2146.
  11. Griggs E., Trageser K., Naughton S., Yang E.J., Mathew B., Van Hyfte G., Hellmers L., Jette N., Estill M., Shen L., Fischer T., Pasinetti G. M. 2023. Recapitulation of pathophysiological features of AD in SARS-CoV-2-infected subjects. Elife. 12, e86333.
  12. Xia X., Wang Y., Zheng J. 2021. COVID-19 and Alzheimer’s disease: How one crisis worsens the other. Transl. Neurodegener. 10, 15.
  13. Gkouskou K., Vasilogiannakopoulou T., Andreakos E., Davanos N., Gazouli M., Sanoudou D., Eliopoulos A. G. 2021. COVID-19 enters the expanding network of apolipoprotein E4-related pathologies. Redox Biol. 41, 101938.
  14. Kotsev S. V., Miteva D., Krayselska S., Shopova M., Pishmisheva-Peleva M., Stanilova S. A., Velikova T. 2021. Hypotheses and facts for genetic factors related to severe COVID-19. World J. Virol. 10, 137.
  15. Naughton S. X., Raval U., Pasinetti G. M. 2020. Potential novel role of COVID-19 in Alzheimer’s disease and preventative mitigation strategies. J. Alzheimers Dis. 76, 21–25.
  16. Bobkova N.V. 2021. The balance between two branches of RAS can protect from severe COVID-19 course. Biochemistry (Moscow), Supplement Series A: Membrane and Cell Biology. 15, 36–51.
  17. Alenina N., Bader M. 2019. ACE2 in brain physiology and pathophysiology: Evidence from transgenic animal models. Neurochem. Res. 44, 1323–1329.
  18. Mahajan S., Sen D., Sunil A., Srikanth P., Marathe S. D., Shaw K., Sahare M., Galande S., Abraham N.M. 2023. Knockout of angiotensin converting enzyme-2 receptor leads to morphological aberrations in rodent olfactory centers and dysfunctions associated with sense of smell. Front. Neurosci. 17, 1180868.
  19. Panariello F., Cellini L., Speciani M., De Ronchi D., Atti A. R. 2020. How does SARS-CoV-2 affect the central nervous system? A working hypothesis. Front. Psychiatry. 11, 582345.
  20. Saikarthik J., Saraswathi I., Al-Atram A. A. 2022. Does COVID-19 affect adult neurogenesis? A neurochemical perspective. In: Recent advances in neurochemistry. Eds Heinbockel T., Weissert R. UK: Intechopen, p. 134.
  21. Gross L.Z., Sacerdoti M., Piiper A., Zeuzem S., Leroux A. E., Biondi R. M. 2020. ACE2, the receptor that enables infection by SARS‐CoV‐2: Biochemistry, structure, allostery and evaluation of the potential development of ACE2 modulators. ChemMedChem. 15, 1682–1690.
  22. Reveret L., Leclerc M., Emond V., Tremblay C., Loiselle A., Bourassa P., Bennett D.A., Hébert S.S., Calon F. 2023. Higher angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) levels in the brain of individuals with Alzheimer’s disease. Acta Neuropathol. Commun. 11, 159.
  23. Komatsu T., Suzuki Y., Imai J., Sugano S., Hida M., Tanigami A., Muroi S., Yamada Y., Hanaoka K. 2002. Molecular cloning, mRNA expression and chromosomal localization of mouse angiotensin-converting enzyme-related carboxypeptidase (mACE2). DNA Sequence, 13, 217–220.
  24. Staroverov V., Galatenko A., Knyazev E., Tonevitsky A. 2024. Mathematical model explains differences in Omicron and Delta SARS-CoV-2 dynamics in Caco-2 and Calu-3 cells. PeerJ. 12, e16964.
  25. Ye M., Wysocki J., Gonzales-Pacheco F.R., Salem M., Evora K., Garcia-Halpin L., Poglitsch M., Schuster M., Batlle D. 2012. Murine Recombinant ACE2: Effect on angiotensin II dependent hypertension and distinctive ACE2 inhibitor characteristics on rodent and human ACE2. Hypertension. 60, 730.
  26. Clever S., Volz A. 2023. Mouse models in COVID-19 research: Analyzing the adaptive immune response. Med. Microbiol. Immunol. 212, 165–183.
  27. Бобкова Н.В., Полтавцева Р.А., Самохин А.Н., Сухих Г.Т. 2013. Терапевтический эффект мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток на память животных с нейродегенерацией альцгеймеровского типа. Клеточные технологии в биологии и медицине. 3, 123–126.
  28. Bobkova N.V., Lyabin D.N., Medvinskaya N.I., Samokhin A.N., Nekrasov P.V., Nesterova I.V., Aleksandrova I.Y., Tatarnikova O.G., Bobylev A.G., Vikhlyantsev I.M., Kukharsky M.S., Ustyugov A.A., Polyakov D.N., Eliseeva I.A., Kretov D.A., Guryanov S G., Ovchinnikov L.P. 2015. The Y-box binding protein 1 suppresses Alzheimer’s disease progression in two animal models. PLoS One. 10, e0138867.
  29. Chaplygina A.V., Zhdanova D.Y., Kovalev V.I., Poltavtseva R.A., Medvinskaya N.I., Bobkova N.V. 2022. Cell therapy as a way to correct impaired neurogenesis in the adult brain in a model of Alzheimer’s disease. J. Evol. Biochem. Physiol. 58, 117–137.
  30. Жданова Д.Ю., Полтавцева Р.А., Свирщевская Е.В., Бобкова, Н.В. 2020. Влияние интраназального введения экзосом мультипотентных мезенхимных стромальных клеток на память у мышей в модели болезни Альцгеймера. Клеточные технологии в биологии и медицине. 4, 289–296.
  31. Oakley H., Cole S.L., Logan S., Maus E., Shao P., Craft J., Vassar R. 2006. Intraneuronal β-amyloid aggregates, neurodegeneration, and neuron loss in transgenic mice with five familial Alzheimer's disease mutations: potential factors in amyloid plaque formation. Eur. J. Neurosci. 26, 10129–10140.
  32. Kimura R., Ohno M. 2009. Impairments in remote memory stabilization precede hippocampal synaptic and cognitive failures in 5XFAD Alzheimer mouse model. Neurobiol. Dis. 33, 229–235.
  33. Peters O.M., Shelkovnikova T., Tarasova T., Springe S., Kukharsky M.S., Smith G.A. 2013. Chronic administration of Dimebon does not ameliorate amyloid-beta pathology in 5xFAD transgenic mice. J. Alzheimers Dis. 36, 589–596.
  34. Papasozomenos S.C., Binder L.I. 1986. Microtubule-associated protein 2 (MAP2) is present in astrocytes of the optic nerve but absent from astrocytes of the optic tract. J. Neurosci. 6, 1748–1756.
  35. Geisert Jr.E.E., Johnson H.G., Binder L.I. 1990. Expression of microtubule-associated protein 2 by reactive astrocytes. PNAS. 87, 3967–3971.
  36. Muñoz-Fontela C., Widerspick L., Albrecht R.A., Beer M., Carroll M. W., de Wit E., Diamond M.S., Dowling W.E., Funnell S.G.P., García-Sastre A., Gerhards N.M., Jong R., Munster V.J., Neyts J., Perlman S., Reed D.S., Richt J.A., Riveros-Balta X., Roy C.J., Salguero F.J., Schotsaert M., Schwartz L.M., Seder R.A., Segalés J., Vasan S.S., Henao-Restrepo A.M., Barouch D.H. 2022. Advances and gaps in SARS-CoV-2 infection models. PLoS Pathog. 18, e1010161.
  37. Caly L., Druce J.D., Catton M.G., Jans D.A., Wagstaff K.M. 2020. The FDA approved drug ivermectin inhibits the replication of SARS-CoV-2 in vitro. Antivir. Res. 178, 104787
  38. Wyler E., Msbauer K., Franke V., Diag A., Landthaler M. 2021. Bulk and single-cell gene expression profiling of SARS-CoV-2 infected human cell lines identifies molecular targets for therapeutic intervention. iScience. 24, 102151
  39. Huang J., Song W., Huang H., Sun Q. 2020. Pharmacological therapeutics targeting RNA-dependent RNA polymerase, proteinase and spike protein: from mechanistic studies to clinical trials for COVID-19. J. Clin. Med. 9, 1131.
  40. Shajahan A., Archer-Hartmann S., Supekar N. T., Gleinich A. S., Heiss C., Azadi P. 2021. Comprehensive characterization of N-and O-glycosylation of SARS-CoV-2 human receptor angiotensin converting enzyme 2. Glycobiology. 31, 410–424.
  41. Yinda C. K., Port J.R., Bushmaker T., Offei Owusu I., Purushotham J.N., Avanzato V.A., Fischer R.J., Schulz J.E., Holbrook M.G., Hebner M.J., Rosenke R., Thomas T., Marzi A., Best S.M., de Wit E., Shaia C., Doremalen N., Munster V.J. 2021. K18-hACE2 mice develop respiratory disease resembling severe COVID-19. PLoS Pathog. 17, e1009195.
  42. Zheng J., Wong L.Y.R., Li K., Verma A. K., Ortiz M. E., Wohlford-Lenane C., Leidinger M. R., Knudson C. M., Meyerholz D. K., McCray Paul B., Perlman S. 2021. COVID-19 treatments and pathogenesis including anosmia in K18-hACE2 mice. Nature. 589, 603–607.
  43. Bao L., Deng W., Huang B., Gao H., Liu J., Ren L., Wei Q., Yu P., Xu Y., Qi F., Qu Y., Li F., Lv Q., Wang W., Xue J., Gong S., Liu M., Wang G., Wang S., Song Z., Zhao L., Liu P., Zhao L., Ye F., Wang H., Zhou W., Zhu N., Zhen W., Yu H., Zhang X., Guo L., Chen L., Wang C., Wang Y., Wang X., Xiao Y., Sun Q., Liu H., Zhu F., Ma C., Yan L., Yang M., Han J., Xu W., Tan W., Peng X., Jin Q., Wu G., Qin, C. 2020. The pathogenicity of SARS-CoV-2 in hACE2 transgenic mice. Nature. 583, 830–833.
  44. Wu Y., Wang F., Shen C., Peng W., Liu L. 2020. A noncompeting pair of human neutralizing antibodies block COVID-19 virus binding to its receptor ACE2. Science. 368, eabc2241
  45. Wang C.W., Chuang H.C., Tan T.H. 2023. ACE2 in chronic disease and COVID-19: Gene regulation and post-translational modification. J. Biomed. Sci. 30, 71.
  46. Garg M., Royce S.G., Tikellis C., Shallue C., Batu D., Velkoska E., Burrell L.M., Patel S.K., Beswick L., Jackson A., Britto K., Lukies M., Sluka P., Wardan H., Hirokawa Y., Tan C.W., Faux M., Burgess A.W., Hosking P., Monagle S., Thomas M., Gibson P.R., Lubel J. 2020. Imbalance of the renin-angiotensin system may contribute to inflammation and fibrosis in IBD: A novel therapeutic target? Gut. 69, 841–851.
  47. Delpino M.V., Quarleri J. 2020. SARS-CoV-2 pathogenesis: Imbalance in the renin-angiotensin system favors lung fibrosis. Front. Cell. Infect. Microbiol. 10, 340.
  48. Gao Y. L., Du Y., Zhang C., Cheng C., Yang H. Y., Jin Y.F., Duan G-C., Chen S.Y. 2020. Role of renin-angiotensin system in acute lung injury caused by viral infection. Infect. Drug Resist. 13, 3715–3725.
  49. Chen R., Wang K., Yu J., Howard D., French L., Chen Z., Wen C., Xu Z. 2021. The spatial and cell-type distribution of SARS-CoV-2 receptor ACE2 in the human and mouse brains. Front. Neurol. 11, 573095.
  50. Qiao J., Li W., Bao J., Peng Q., Wen D., Wang J., Sun B. 2020. The expression of SARS-CoV-2 receptor ACE2 and CD147, and protease TMPRSS2 in human and mouse brain cells and mouse brain tissues. Biochem. Biophys. Res. Commun. 533, 867–871.
  51. Xu J., Lazartigues E. 2022. Expression of ACE2 in human neurons supports the neuro-invasive potential of COVID-19 virus. Cell Mol Neurobiol. 42, 305–309.
  52. Morgun A.V., Salmin V.V., Boytsova E.B., Lopatina O.L., Salmina, A. B. 2020. Molecular mechanisms of proteins—targets for SARS-CoV-2. Современные технологии в медицине. 12 (6), 98–108.
  53. Netland J., Meyerholz D.K., Moore S., Cassell M., Perlman S. 2008. Severe acute respiratory syndrome coronavirus infection causes neuronal death in the absence of encephalitis in mice transgenic for human ACE2. J. Virol. 82, 7264–7275.
  54. Scoppettuolo P., Borrelli S., Naeije G. 2020. Neurological involvement in SARS-CoV-2 infection: A clinical systematic review. Brain Behav. Immun. Health. 5, 100094.
  55. Song E., Zhang C., Israelow B., Lu-Culligan A., Prado A.V., Skriabine S., Lu P., Weizman O.E., Liu F., Dai Y., Szigeti-Buck K., Yasumoto Y., Wang G., Castaldi C., Heltke J., Ng E., Wheeler J., Alfajaro M.M., Levavasseur E., Fontes B., Ravindra N.G., Van Dijk D., Mane S., Gunel M, Ring A., Kazmi S.A.J., Zhang K., Wilen C.B., Horvath T.L., Plu I., Haik S., Thomas J.L., Louvi A., Farhadian S.F., Huttner A., Seilhean D., Renier N., Bilguvar K., Iwasaki A. 2021. Neuroinvasion of SARS-CoV-2 in human and mouse brain. J. Exp. Med. 218, e20202135.
  56. Agulhon C., Petravicz J., McMullen A.B., Sweger E.J., Minton S.K., Taves S.R., Casper K.B., Fiacco T.A., McCarthy K.D. 2008. What is the role of astrocyte calcium in neurophysiology? Neuron. 59, 932–946.
  57. Mitroshina E.V., Pakhomov A.M., Krivonosov M.I., Yarkov R.S., Gavrish M.S., Shkirin A.V., Ivanchenko M.V., Vedunova M.V. 2022. Novel algorithm of network calcium dynamics analysis for studying the role of astrocytes in neuronal activity in Alzheimer's disease models. Int J Mol Sci. 23, 15928.
  58. Calvo-Rodríguez M., de la Fuente C., García-Durillo M., García-Rodríguez C., Villalobos C., Núñez L. 2017. Aging and amyloid β oligomers enhance TLR4 expression, LPS-induced Ca2+ responses, and neuron cell death in cultured rat hippocampal neurons. J Neuroinflammation. 14, 24.
  59. Calvo-Rodríguez M., García-Durillo M., Villalobos C., Núñez L. 2016. Aging enables Ca2+ overload and apoptosis induced by amyloid-β oligomers in rat hippocampal neurons: Neuroprotection by non-steroidal anti-inflammatory drugs and R-flurbiprofen in aging neurons. J. Alzheimers Dis. 54, 207–221.
  60. Елисеева И.А., Ким Е.Р., Гурьяно, С.Г., Овчинников Л.П., Лябин, Д.Н. 2011. Y-бокс-связывающий белок 1 (YB-1) и его функции. Успехи биол. химии. 51, 65–163.
  61. Stavrovskaya A., Stromskaya T., Rybalkina E., Moiseeva N., Vaiman A., Guryanov S., Ovchinnikov L., Guens, G. 2012. YB-1 protein and multidrug resistance of tumor cells. Curr. Signal Transduct. Ther. 7, 237–246.
  62. Steardo L., Steardo L.Jr., Zorec R., Verkhratsky A. 2020. Neuroinfection may contribute to pathophysiology and clinical manifestations of COVID-19. Acta Physiol. (Oxf). 229, e13473.
  63. Esquivel D., Mishra R., Soni P., Seetharaman R., Mahmood A., Srivastava A. 2021. Stem cells therapy as a possible therapeutic option in treating COVID-19 patients. Stem cell reviews and reports. 17, 144–152.
  64. Musial C., Gorska-Ponikowska M. 2021. Medical progress: Stem cells as a new therapeutic strategy for COVID-19. Stem Cell Research. 52, 102239.
  65. Kebria M.M., Milan P. B., Peyravian N., Kiani J., Khatibi S., Mozafari M. 2022. Stem cell therapy for COVID-19 pneumonia. Mol. Biomed. 3, 6.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Влияние ингибитора ACE2 на площадь иммунопозитивной окраски маркера астроцитов (GFAP – зеленый) и маркера нейронов (MAP2 – красный) в первичных клеточных культурах гиппокампа нетрансгенных (nTg) и трансгенных (Tg) мышей. a – Нативная первичная культура гиппокампа nTg мыши (nTg). б – Влияние MLN-4760 на нативную первичную культуру гиппокампа nTg мыши (nTg MLN). в – Нативная первичная культура гиппокампа Tg мыши 5xFAD (Tg). г – Влияние MLN-4760 на первичную культуру гиппокампа Tg мыши 5xFAD (Tg MLN). д – Плотность нейронов и астроцитов (в %). * p < 0.05, однофакторный ANOVA с последующими посттестами Данна. Шкала – 250 мкм.

Скачать (758KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Структурные изменения астроцитов (GFAP – зеленый) и нейронов (MAP2 – красный) в первичных nTg клеточных культурах гиппокампа после действия MLN-4760. nTg – Нативная первичная культура гиппокампа. MLN – Влияние MLN-4760 на первичную культуру гиппокампа. Шкала – 125 мкм.

Скачать (437KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Позитивное действие YB-1 на плотность нейронов и астроцитов в культурах Tg и nTg мышей, подвергнутых действию блокатора АСЕ2. Иммунопозитивность к маркеру астроцитов (GFAP – зеленый) и маркеру нейронов (MAP2 – красный). a – эффект YB-1 на nTg культуру, подвергнутую действию блокатора ACE2 (nTg). б – эффект YB-1 на Tg культуру, подвергнутую действию блокатора ACE2 (Tg). в – Плотность нейронов и астроцитов (в %) в nTg культуре в отсутствие MLN-4760 (nTg), под влиянием MLN-4760 (MLN), после действия YB-1 (MLN + YB-1). г – Плотность нейронов и астроцитов (в %) в Tg культуре 5xFAD в отсутствие MLN-4760 (nTg), под влиянием MLN-4760 (MLN), после действия YB-1 (MLN + YB-1). * p < 0.05, однофакторный ANOVA с последующими посттестами Данна. Шкала – 250 мкм.

Скачать (488KB)
Метаданные
5. Рис. 4. Влияние введения YB-1 на нейроны (MAP2 – красный) и астроциты (GFAP – зеленый) в первичных nTg нейроглиальных культурах гиппокампа, подвергнутых воздействию MLN-4760. Шкала – 125 мкм.

Скачать (216KB)
Метаданные
6. Рис. 5. Влияние ММСК на нейроны (MAP2 – красный) и астроциты (GFAP – зеленый) в nTg клеточной культуре гиппокампа, подвергнутой воздействию MLN-4760. Шкала – 125 мкм.

Скачать (220KB)
Метаданные
7. Рис. 6. Влияние ММСК (ядра ММСК – синий) на иммунопозитивность астроцитов (маркер GFAP – зеленый) и нейронов (маркер MAP2 – красный) в первичных культурах гиппокампа nTg и Tg мышей. a – ММСК вводили в nTg культуру после ингибирования ACE2. б – ММСК вводили в Tg культуру 5xFAD после ингибирования ACE2. в – Плотность нейронов и астроцитов (в %) в nTg культуре в отсутствие MLN-4760 (nTg), под влиянием MLN-4760 (MLN), после действия ММСК (MLN + ММСК). г – Плотность нейронов и астроцитов (в %) в Tg культуре 5xFAD в отсутствие MLN-4760 (Tg), под влиянием MLN-4760 (MLN), после действия ММСК (MLN + ММСК).** p < 0.001, однофакторный ANOVA с последующими посттестами Бонферрони. * p < 0.05, однофакторный ANOVA с последующими посттестами Данна. Шкала – 250 мкм.

Скачать (385KB)
Метаданные

© Российская академия наук, 2025