Polymorphism of the serotonin 5HT1A receptor genes 5HT2A and in the diagnosis of overactive bladder in women (study results)

Full Text

Актуальность В настоящее время чрезвычайно важным является поиск потенциальных предикторов, которые могут помочь в идентификации генов-кандидатов диагностики гипер- активного мочевого пузыря (ГМП). Ни один фактор, гене- тический или фактор среды, нельзя считать единственной «причиной» развития ГМП, т.е. данное заболевание отно- сится к мультифакториальным или болезням с наслед- ственным предрасположением. По данным P.Moorthy и со- авт., генетический фактор в 19% случаев является опреде- ляющим в патогенезе ГМП. Сам факт наличия такой пред- расположенности не подвергается сомнению, но пути ее реализации до конца неясны. Это связано прежде всего со сложностью и динамичностью организма человека. Од- нако относительно общей популяции симптомы ГМП ча- сто возникают у пациентов с тревожными состояниями и депрессией [1, 2]. Продолжая развивать это направление, по результатам опроса, согласно Госпитальной шкале тревоги и депрессии, полученным у 84 женщин с ГМП, частота тре- воги и депрессии составила 87%, из них у 83% соответство- вала клинически выраженному уровню тревоги и депрес- сии. Серотонин, участвующий во множестве нейрофизио- логических и психических процессов в центральной нерв- ной системе, тормозит развитие агрессии или депрессив- ных состояний. Более высокая предрасположенность жен- щин к эмоциональным расстройствам объясняется низким уровнем серотонина и нарушением механизма серотони- новой передачи в период гормональной перестройки [3]. У человека ген рецептора серотонина HTR1A локализован на длинном плече 5-й хромосомы в области q11.2-q13, ген рецептора серотонина НТR2А находится на длинном плече 13-й хромосомы в области q14-q21, кодирует порядка 15 рецепторов серотонина, которые связывают гормоны, факторы роста и другие эндогенные лиганды. Среди них в качестве возможных предикторов диагностики ГМП выде- лили наиболее экспрессируемые в мозге - ген рецептора серотонина 1А (5HT1A) и в периферических тканях - ген рецептора серотонина 2А (5HT2A). Полиморфизмы генов определяют особенности индивидуального реагирования на любые изменения внешней среды. Согласно литературным данным предполагается, что в результате замены G на С в положении -1019 гена HTR1A экспрессия рецепторов 5HT1A усиливается и приводит к ослаблению серотонин- ергической нейротрансмиссии. Также было высказано предположение, что активация рецепторов 5HT2A при за- мене G на А в положении -1438 гена HTR2A приводит к воз- никновению депрессии, вегетативных расстройств и высо- кому риску развития синдрома раздраженного кишечника [4]. Все изложенное позволило сформулировать цель на- стоящей работы - изучить роль полиморфизма генов ре- цепторов серотонина 5HT1A и 5HT2A у женщин с ГМП. Материалы и методы исследования В ФГБУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И.Кулакова» за период с 2010 по 2013 г. были обследованы 84 женщины с идиопатическим ГМП (средний возраст 53,80±1,58 года) и 102 женщины (средний возраст 53,67±1,70 года) без ГМП, которые соста- вили контрольную группу. Объем выборки для данного ис- следования составил 186 женщин. Критерии исключения: инфекция и другая патология мочевыводящих путей; нейрогенные расстройства мочеиспускания; диабетическая нейропатия; глаукома; тяжелый язвенный колит; миастения; менее 30 дней после лечения ГМП до ввода в исследова- ние. Критерии включения: женщины в возрасте 18 лет и старше с наличием поллакиурии (дневное мочеиспуска- ние - 8 раз и чаще) и ноктурии (ночное мочеиспускание - 2 раза и чаще) в течение 3 мес и более, 3 ургентных позывов на мочеиспускание, по данным дневника учета мочеиспус- каний, с недержанием мочи или без него в течение 3 дней. Молекулярно-генетические методы исследования. Выде- ление ДНК выполнено по методу Higuchi с некоторыми мо- дификациями, генотипирование осуществлено модифици- рованным методом примыкающих проб с использованием оригинальных олигонуклеотидов. Таблица 1. HTR1A -1019 (1016) C>G (rs6295) n Аллели Основная группа Контрольная группа абс. % абс. % 1 G/G 19 26,4 26 28,9 2 C/G 38 52,8 45 50,0 3 C/C 15 20,8 19 21,1 Таблица 2. HTR1A -1019 (1016) C>G (rs6295) n Аллели Основная группа Контрольная группа Всего 1 G/G 19 26 45 2 C/G 38 45 83 3 Всего 57 71 128 Примечание. χ2=0,15. Таблица 3. HTR1A -1019 (1016) C>G (rs6295) n Аллели Основная группа Контрольная группа Всего 1 G/G 19 26 45 2 C/C 15 19 34 3 Всего 34 45 79 Примечание. χ2=0,028. Таблица 4. HTR1A -1019 (1016) C>G (rs6295) n Аллели Основная группа Контрольная группа Всего 1 C/G 38 45 83 2 C/C 15 19 34 3 Всего 53 64 117 Примечание. χ2=0,027. Таблица 5. HTR2A 102 C>Т (S34S) (rs6313) n Аллели Основная группа Контрольная группа абс. % абс. % 1 C/C 32 44,4 33 36,7 2 C/T 30 41,7 47 52,2 3 T/T 10 13,9 10 11,1 Таблица 6. HTR2A 102 C>Т (S34S) (rs6313) n Аллели Основная группа Контрольная группа Всего 1 C/C 32 33 65 2 C/T 30 47 77 3 Всего 62 80 142 Примечание. χ2=1,511. Таблица 7. HTR2A 102 C>Т (S34S) (rs6313) n Аллели Основная группа Контрольная группа Всего 1 C/C 32 33 65 2 Т/T 10 10 20 3 Всего 42 43 85 Примечание. χ2=0,004. Таблица 8. HTR2A 102 C>Т (S34S) (rs6313) n Аллели Основная группа Контрольная группа Всего 1 C/Т 30 47 77 2 Т/T 10 10 20 3 Всего 40 57 97 Примечание. χ2=0,798. Количественный анализ данных проведен с примене- нием Microsoft Office Excel 2007 и методов описательной статистики (критерий χ2). Данное исследование было одобрено Комитетом по этике биомедицинских исследований. Результаты Полиморфные варианты генов рецепторов серотонина 1А (5HT1A) в основной (с ГМП) и контрольной группе представлены в табл. 1. Мы сравнивали группы по парамет- рам распределения частот аллелей, чтобы найти или ис- ключить различия. Результаты анализа значимости данных методом χ2 при- ведены в табл. 2-4. Интерпретация полученных данных. Сравнения распределения частот аллелей гена HTR1A -1019 (1016) C>G (rs6295) в основной (с ГМП) и контрольной группе со значениями χ2 для таблиц сопряженности (без поправки Иэйтса) χ2=0,15, χ2=0,028 и χ2=0,027 показали, что различия являются незначимыми, так как значения χ2 располагаются в интервале от 0 до 3,84, и вероятность того, что реально наблюдаемый результат является чисто случайным, равна, по крайней мере, 1 из 20. Интерпретация полученных данных. Сравнения ча- стот аллелей гена HTR2A 102 C>Т (S34S) (rs6313) в основ- ной (с ГМП) и контрольной группе со значениями χ2 для таблиц сопряженности (без поправки Иэйтса) χ2=1,511, χ2=0,004, χ2=0,798 показали, что различия незначимы, так как значения χ2 располагаются в интервале от 0 до 3,84, и вероятность того, что реально наблюдаемый результат яв- ляется чисто случайным, равна, по крайней мере, 1 из 20. Обсуждение полученных результатов При изучении связи генетического полиморфизма в серотонинергической системе (5HT1A и 5HT2A) и сопостав- лении своих данных с данными других авторов выявлено следующее. По литературным данным, участие замены -1019 С>G гена HTR1A приводит к изменению связывания ингибирующего фактора транскрипции гена HTR1A. Следствием является усиление экспрессии рецептора 5HT1A, что в результате приводит к ослаблению серотонинергиче- ской нейротрансмиссии. Показано, что функциональный полиморфизм -1019 G/C ассоциирован с тревожностью и склонностью к депрессии в характере, однако другие ис- следователи не нашли взаимосвязи данного полимор- физма с этими чертами личности [5-9]. Согласно полученным результатам полиморфных вари- антов генов рецепторов серотонина HTR1A -1019 (1016) C>G (rs6295) и HTR2A 102 C>Т (S34S) (rs6313) не выявило значимых различий в распределении частот аллелей между основной (с ГМП) и контрольной группой (см. табл. 1, 5). В 2011 г. опубликовано сразу несколько работ о полимор- физме генов рецепторов серотонина 1А и 2А, которые в ос- новном связаны с депрессией. M.Kamata и соавт. изучали связь генетического полиморфизма в серотонинергиче- ской системе (генотипов триптофангидроксилазы 218 A/C, переносчика серотонина 5HTTLPR и рецептора 1438 G/A 5HT2A) и депрессии (дисфории, отсталости и вегетатив- ных симптомов) и доказали (с использованием метода множественного регрессионного анализа), что аллель -1438G/A полиморфизма 5HT2A связан с общей депрес- сией (р=0,005) и вегетативными расстройствами (р=0,001), а аллель S из 5HTTLPR - с дисфорией (р=0,012). Ограниче- нием исследования была относительно небольшая вы- борка [10]. M.Lebe и соавт. связывают повышение чувствительности к боли и депрессии у пациентов после поясничной хирур- гии с изменением рецепторов 5HTR1A, 5HTR2A и 5HTT [11]. С использованием позитронно-эмиссионной томогра- фии E.Moses-Kolko и соавт. исследовали изменения не только уровня гормонов, но и рецепторов серотонина 1A и 2A в зависимости от возраста и пола (здоровая популяция в возрасте от 20 до 80 лет, n=71) и выявили, что у женщин с возрастом отмечается небольшое увеличение уровня эстрадиола и постсинаптических рецепторов 5HT1A (р=0,004-0,005), у мужчин тенденция к небольшому сниже- нию уровня свободных андрогенов и рецепторов 5HT1A (р=0,05-0,06) [12]. По результатам исследования T.Markoutsaki и соавт., но- сители аллеля -1438 (G/A) полиморфизма рецепторов гена 5HT2A имеют высокий риск развития синдрома раздра- женного кишечника [13]. Заключение Полученные нами данные не позволяют однозначно высказаться о связи полиморфизма генов рецепторов серото- нина 5HT1A и 5HT2A, а точнее, замены C на G в положении - 1019 (1016) (rs6295) гена HTR1A и C на Т в положении 102 (S34S) (rs6313) гена HTR2A и симптомокомплекса ГМП у женщин. Возможно, ограничением исследования была отно- сительно небольшая выборка. Может быть, с риском ГМП связаны полиморфизмы в других областях генов HTR1A и HTR2A? Симптомы ГМП часто возникают у пациентов с тре- вожными состояниями и депрессией. Серотонин тормозит развитие агрессии или депрессивных состояний. По резуль- татам опроса, согласно Госпитальной шкале тревоги и де- прессии, полученным у 84 женщин основной группы (с ГМП), частота тревоги и депрессии составила 87%, из них у 83% соответствовала клинически выраженному уровню тре- воги и депрессии. Согласно результатам полиморфных ва- риантов генов рецепторов серотонина HTR1A -1019 (1016) C>G (rs6295) и HTR2A 102 C>Т (S34S) (rs6313) мы не нашли различий в распределении частот аллелей между основной (с ГМП) и контрольной группой, и это может отражать гете- рогенность причин и факторов риска при ГМП. Возможно, накопление результатов в дальнейшем приведет к опреде- ленным выводам и выходу в клинику. Есть основание утвер- ждать, что подобные исследования позволят понять молеку- лярно-генетические механизмы предрасположенности ГМП, что сделает возможным сформировать группы высо- кого или низкого риска по отношению к развитию ГМП.

About the authors

F N Makhmejanova

Email: fmakhmed@mail.ru

I A Apolikhina

References

Supplementary files